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液相色譜柱實(shí)驗(yàn)過程基線漂移原因和解決

更新時(shí)間:2018-05-04 點(diǎn)擊次數(shù):3806
液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
 
液相色譜柱在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移的原因
1、柱溫波動(dòng)。
解決方法:控制好柱子和活動(dòng)相的溫度,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱。
2、流通池被污染或有氣體。
解決方法:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。
3、紫外燈能量不足。
解決方法:更換新的紫外燈。
4、活動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。
解決方法:檢查活動(dòng)相的組成,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑。
5、樣品中有強(qiáng)保存的物質(zhì)以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線。
解決方法:使用保護(hù)柱,如有必要,在進(jìn)樣之間。在分析過程中,定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
6、檢測(cè)器沒有設(shè)定在吸收波優(yōu)點(diǎn)。
解決方法:將波長(zhǎng)調(diào)整至吸收波優(yōu)點(diǎn)。
7、活動(dòng)相的PH值沒有調(diào)節(jié)好。
 
液相色譜柱漂移保存時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志,同一種東西,兩次的保存時(shí)間相差不要超過15s,超過了半分鐘可看做保存時(shí)間漂移,就無法進(jìn)行定性,你要考慮以下原因:
1、溫控不當(dāng)。解決方法:調(diào)好柱溫,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對(duì)著柱溫箱。
2、活動(dòng)相比例變化。解決方法:檢查四元泵的比例閥是否有故障。
3、色譜柱沒有平衡。解決方法:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。
4、流速變化。解決方法:重新設(shè)定流速。
5、泵中有氣泡。解決方法:從泵中除往氣泡。

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