嬰幼兒食品和乳品中乳清蛋白的測定

更新時間：2022-04-15 點擊次數(shù)：999

乳清蛋白是采用先進工藝從牛奶中分離提取出來的珍貴蛋白質(zhì)，以其具有高生物價、高消化率、高蛋白質(zhì)功效比和高利用率等優(yōu)點，被譽為“蛋白zhi王"，是*的人體優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)補充劑之一。其含量的高低決定了嬰幼兒奶粉的品質(zhì)，相關國標通過酸水解以后的氨基酸來評價乳清蛋白的含量，月旭科技推出的檢測方法檢測更加快捷可靠。

樣品前處理

稱取0.1g試樣（含蛋白質(zhì)7.5mg-25mg的樣品），于水解管中，在冰水浴中冷卻 30min后加入2mL已經(jīng)冷卻的過甲酸溶液，蓋好瓶塞后置于0℃±1℃冰箱中，冰浴16h。向各水解管中加入0.3mL氫溴酸，振搖后冰浴 30min，在60℃±2℃氮吹儀上濃縮至干。向水解管內(nèi)加入6moL/L鹽酸10mL，沖入氮氣1min 后，擰緊螺絲蓋，將水解管放在110℃±1℃的恒溫干燥箱內(nèi)水解24h后取出冷卻至室溫。將水解液用超純水轉(zhuǎn)移并定容至25mL容量瓶中，混勻，濾紙過濾。吸取濾液1mL于60℃±2℃氮吹儀上濃縮至干，殘留物用1mL超純水溶解，待衍生。

標準品溶液

用超純水配置磺基丙氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸標準品溶液1μmoL/mL，待衍生。

衍生方法

分別將月旭科技氨基酸衍生方法包中 A、B兩種衍生試劑用稀釋劑稀釋至原來濃度的 1/5；精密量取混標溶液及樣品溶液各160μL，加入稀釋后的衍生溶液 A、B 各100μL，混勻，室溫反應60min；然后加入正己烷溶液 400μL，旋緊蓋子后振搖10s，室溫靜置分層，取下層液200μL，加入800μL水中，混勻；再移取200μL加入到800μL水中，混勻，用0.45μm 有機濾膜過濾，即得。

色譜條件

色譜柱：月旭Ultimate^® AQ-C18（4.6×250mm，3μm）。

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