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色譜柱使用過程中,如何沖洗或反沖?

更新時間:2019-07-11 點擊次數(shù):30775
   色譜柱在液相系統(tǒng)中起著分離的作用,是液相色譜系統(tǒng)的核心部件之一。柱管材質(zhì)有玻璃、不銹鋼、鋁銅、peek以及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他材質(zhì)。一般細粒度的填料采用勻漿填充法裝柱,先將填料調(diào)成勻漿,在高壓泵作用下,快速將其壓入裝有洗脫液的色譜柱內(nèi),經(jīng)沖洗后備用。
  色譜柱使用過程中,如果壓力升高,或出現(xiàn)污染,選擇適當?shù)臈l件沖洗或反沖。
  1.適用于C18、C8、C4、C1、苯基、PFP、AQ等
  使用至少20倍柱體積的含有≥30%誰的極性郵寄溶劑(如乙腈)作為流動相除去柱子中的緩沖鹽;使用至少20倍柱體積的含有95%極性郵寄溶劑(如乙腈)沖洗色譜柱。
  污染物的去除常規(guī)星期后柱校沒有明顯恢復時,使用50%異丙醇/乙腈以低流速清洗20倍柱體積以除去污染物。
  2.適用于氨基柱、氰基柱
  常規(guī)清洗:乙腈:水=60:40條件對色譜柱進行沖洗,清洗時不建議水相比例超過40%,過高使用水相容易導致鍵和相水解。
  色譜柱再生:當色譜柱經(jīng)過長期使用,柱校降低時,可以對色譜柱進行再生,乙腈:水(水中加入0.05%氨水)=60:40條件沖洗30倍柱體積。
  3.適用于離子交換柱SCX、SAX沖洗方法
  日常沖洗:用100%水沖洗30個柱體積除鹽,然后用20%甲醇或乙腈沖洗20個柱體積后保存在20%甲醇或乙腈中。
  長期保存:用100%水沖洗30個柱體積去除鹽,然后用50%乙腈;50%水沖洗20個柱體積后保存在50%乙腈:50%水中。
  再生:先用高濃度的緩沖鹽(不超過1M),然后再用100%水洗,100%乙腈或甲醇沖洗,再用20%乙腈或甲醇保存。(以上操作可根據(jù)實驗室自身SOP視情況而定)

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